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凝膠成像 經(jīng)典知識(shí)剖析(一)
  • 發(fā)布日期:2022-04-28     信息來源:      瀏覽次數(shù):1879
    • 那么下面上海嘉鵬科技有限公司為大家簡(jiǎn)單介紹一下凝膠成像 ,經(jīng)典知識(shí)剖析(一):
      凝膠成像即對(duì)DNA或RNA膠進(jìn)行切膠、拍照、觀察、分析的實(shí)驗(yàn)室類儀器,凝膠成像系統(tǒng)可以應(yīng)用于分子量計(jì)算、密度掃描、密度定量、PCR定量等生物工程常規(guī)研究。凝膠成像系統(tǒng)的基本骨架包含:CCD相機(jī),暗室和分析軟件。系統(tǒng)提供白光和紫外光以及藍(lán)光光源進(jìn)行拍攝凝膠,由系統(tǒng)自帶的圖像捕捉軟件捕捉拍攝圖像,然后由系統(tǒng)自帶的圖像分析軟件對(duì)拍攝的圖像進(jìn)行分析。
      ① 原理  
      樣品中各組分在電泳凝膠或者其他載體上的遷移率不一樣,以標(biāo)準(zhǔn)品或者其他的替代標(biāo)準(zhǔn)品相比較就會(huì)對(duì)未知樣品作一個(gè)定性分析。這個(gè)就是圖像分析系統(tǒng)定性的基礎(chǔ)。根據(jù)未知樣品在圖譜中的位置可以對(duì)其作定性分析,就可以確定它的成份和性質(zhì)。

      樣品對(duì)投射或者反射光有部分的吸收,從而照相所得到的圖像上面的樣品條帶的光密度就會(huì)有差異。光密度于樣品的濃度或者質(zhì)量成線性關(guān)系。根據(jù)未知樣品的光密度,通過于已知濃度的樣品條帶的光密度指相比較就可以得到未知樣品的濃度或者質(zhì)量。這就是圖像分析系統(tǒng)定量的基礎(chǔ)。采用*新技術(shù)的紫外透射光源和白光透射光源使光的分布更加均勻,*大限度的消除了光密度不均造成的對(duì)結(jié)果的影響。


      ②種 類  

      1、普通凝膠成像分析系統(tǒng):可以對(duì)蛋白電泳凝膠,DNA凝膠樣品進(jìn)行圖象采集并進(jìn)行定性和定量分析,樣品包括:EB、SYBR Green、SYBR Gold、Texas Red、GelStar、Fluoroscecin、 Radiant Red等染色的核酸監(jiān)測(cè);以及Coomassie Blue、SYPRO Orange、各種染色的蛋白質(zhì)凝膠如考染等。(或UV,EB和有色及可見樣品成像);
      2、化學(xué)發(fā)光成像分析系統(tǒng):成像范圍涵蓋UV,EB,化學(xué)發(fā)光、紫外-熒光、有色及可見樣品成像;
      3、多色熒光成像分析系統(tǒng):成像范圍涵蓋UV,EB,化學(xué)發(fā)光、多色熒光熒光、有色及可見樣品;

      4、多功能活體成像分析系統(tǒng):UV,EB,化學(xué)發(fā)光、多色熒光熒光、有色及可見樣品成像和離體組織和小型動(dòng)物,及大型型動(dòng)物。


      ③ 特 點(diǎn)

      自動(dòng)對(duì)焦
      自動(dòng)對(duì)焦(Auto Focus)凝膠成像分析系統(tǒng),解決了新手在拍攝凝膠照片過成中,經(jīng)常發(fā)生的被拍攝照片的亮度和對(duì)比度,焦距不準(zhǔn)使照片不清晰的問題。利用物體光反射的原理,將反射的光被相機(jī)上的傳感器CCD接受,通過計(jì)算機(jī)處理,帶動(dòng)電動(dòng)對(duì)焦裝置進(jìn)行對(duì)焦的方式叫自動(dòng)對(duì)焦.它多分為二類:一是主動(dòng)式,另一個(gè)則是被動(dòng)式。
      a、主動(dòng)式自動(dòng)對(duì)焦:相機(jī)CCD上的紅外線發(fā)生器、超聲波發(fā)生器發(fā)出紅外光或超聲波到被攝體。相機(jī)CCD上的接受器接受反射回來的紅外光或超聲波進(jìn)行對(duì)焦,其光學(xué)原理類似三角測(cè)距對(duì)焦法,廣泛用于各種平視取景相機(jī).主動(dòng)式對(duì)焦對(duì)斜面,光滑面對(duì)焦困難.對(duì)亮度大,遠(yuǎn)距離的被攝體對(duì)焦困難.這是由于發(fā)出的光被反射到其它方向,或達(dá)不到被攝體所至.主動(dòng)式由于是相機(jī)主動(dòng)發(fā)出光或波,所以可以在低反差、弱光線下對(duì)焦.對(duì)細(xì)線條的被攝體,對(duì)動(dòng)體都能自動(dòng)對(duì)焦.缺點(diǎn)是當(dāng)被攝體能吸收光或波時(shí)對(duì)焦困難,還會(huì)被玻璃反射故透過玻璃對(duì)焦困難。
      b、 被動(dòng)式自動(dòng)對(duì)焦:即直接接收分析來自景物自身的反光,進(jìn)行自動(dòng)對(duì)焦的方式.這種自動(dòng)對(duì)焦方式的優(yōu)點(diǎn)是;自身不要發(fā)射系統(tǒng)。對(duì)具有一定亮度的被攝體能理想的自動(dòng)對(duì)焦,在逆光下也能良好的對(duì)焦.對(duì)遠(yuǎn)處亮度大的物體能自動(dòng)對(duì)焦。但缺點(diǎn)是對(duì)細(xì)線條的被攝體自動(dòng)對(duì)焦較困難.在低反差,弱光下的對(duì)焦困難.對(duì)動(dòng)體自動(dòng)對(duì)焦能力差.對(duì)含偏光的被攝體自動(dòng)對(duì)焦能力差.黑色物體或鏡面的對(duì)焦能力差。主動(dòng)、被動(dòng)式自動(dòng)對(duì)焦方式各有千秋,好在我們開創(chuàng)的凝膠成像自動(dòng)對(duì)焦拍攝系統(tǒng)上有二種自動(dòng)對(duì)焦方式,可以互補(bǔ)使用,自動(dòng)切換,發(fā)揮其強(qiáng)項(xiàng),克服其弱點(diǎn)。

      以上就是上海嘉鵬科技有限公司為大家整理總結(jié)關(guān)于凝膠成像 經(jīng)典知識(shí)剖析(一)。
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